La electroforesis es una técnica de laboratorio que se realiza con el objetivo de separar moléculas de ADN, ARN o proteínas según su tamaño y carga eléctrica.
Esta técnica es sencilla y de bajo coste y permite diagnosticar enfermedades, como la anemia falciforme, comprobar la expresión de proteínas o identificar microorganismos.
La electroforesis se utiliza como técnica de rutina en laboratorios y proyectos de investigación, y dependiendo del propósito de este examen, pueden ser necesarias otras pruebas para llegar a ciertos diagnósticos.
Para qué sirve
La electroforesis se utiliza para:
- Identificar virus, hongos, bacterias y parásitos, siendo esta aplicación más común en proyectos de investigación;
- Prueba de paternidad;
- Comprobar la expresión de proteínas;
- Identificar mutaciones, siendo de utilidad en el diagnóstico de leucemias, por ejemplo;
- Analizar los tipos de hemoglobina circulante, lo cual es útil en el diagnóstico de anemia falciforme;
- Evaluar la cantidad de proteínas presentes en la sangre;
- Diagnosticar afecciones que afectan a las células plasmáticas, como la macroglobulinemia de Waldenström, la gammapatía monoclonal de significado indeterminado (GMSI) o la amiloidosis primaria.
La electroforesis de proteínas también se puede utilizar para ayudar a diagnosticar problemas de tiroides, diabetes, enfermedades hepáticas y algunas enfermedades autoinmunes.
Dependiendo del objetivo de la electroforesis, puede ser necesario realizar otras pruebas complementarias, como un hemograma, pruebas de función renal y hepática o radiografías, por ejemplo, para que el médico pueda concluir el diagnóstico.
Tipos de electroforesis
La electroforesis para identificar microorganismos se realiza más comúnmente en laboratorios de investigación, sin embargo, con fines de diagnóstico, la electroforesis puede usarse para identificar enfermedades hematológicas y enfermedades que evolucionan con un aumento en la cantidad de proteínas, siendo los principales tipos de electroforesis:
1. Electroforesis de hemoglobina
La electroforesis de hemoglobina es una técnica de laboratorio que se realiza para identificar los diferentes tipos de hemoglobina que circulan en la sangre, permitiendo identificar la presencia de enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina.
El tipo de hemoglobina se identifica mediante electroforesis a un pH específico, idealmente entre 8,0 y 9,0, con un patrón de bandas que se puede comparar con el patrón normal, lo que permite identificar la presencia de hemoglobina anormal.
Para qué está hecho: La electroforesis de hemoglobina se realiza para investigar y diagnosticar enfermedades relacionadas con la síntesis de hemoglobina, como la anemia falciforme y la enfermedad de la hemoglobina C, además de ser útil para diferenciar las talasemias. Aprenda a interpretar la electroforesis de hemoglobina.
2. electroforesis de proteínas
La electroforesis de proteínas es una prueba solicitada por un médico para evaluar la cantidad de proteínas que circulan en la sangre y así identificar enfermedades.
Esta prueba se realiza a partir de una muestra de sangre, que se centrifuga para obtener plasma, que es la parte de la sangre formada, entre otras sustancias, por proteínas.
Tras la electroforesis se puede visualizar un patrón de bandas y, posteriormente, un gráfico que indica la cantidad de cada fracción proteica, fundamental para el diagnóstico.
Para qué está hecho: La electroforesis de proteínas permite al médico investigar la aparición de mieloma múltiple, deshidratación, cirrosis, inflamación, enfermedad hepática, pancreatitis, lupus e hipertensión según el patrón de bandas y el gráfico presentado en el informe del examen. Entender cómo se hace y cómo entender los resultados de la electroforesis de proteínas.
Como esta hecho
Para realizar la electroforesis, es necesario:
- Preparar un gel de agarosa o poliacrilamida., dependiendo del objetivo de realizar la técnica. Además, se debe contar con una solución tampón, tanque de electroforesis, marcador de peso molecular y una sustancia capaz de permitir visualizar las muestras al exponerlas a luz UV o LED;
- Coloque cada muestra en un pocillo del gel.mezclar una pequeña cantidad de marcador de peso molecular;
- Coloque un control positivo en uno de los pocillos., que es la sustancia que sabemos cuál es, y en otro bien, el control negativo, para garantizar la validez de la reacción. En ambos pocillos también debe haber un marcador de peso molecular;
- Coloque el gel en la tina de electroforesis., en caso contrario, con la solución tampón específica, y encender el dispositivo para que se genere una corriente eléctrica capaz de generar una diferencia de potencial y separar las partículas según su carga y tamaño. El tiempo de ejecución electroforética varía según el objetivo del procedimiento y puede durar hasta 1 hora;
- Visualice el resultado de la electroforesis utilizando el transiluminador.. Cuando el gel se coloca bajo luz UV o LED, es posible visualizar el patrón de bandas: cuanto más grande es la molécula, menor es su migración, acercándose al pozo, mientras que cuanto más ligera es la molécula, mayor es el potencial migratorio. .
Para validar la reacción se deben visualizar las bandas del control positivo y en el control negativo no se debe ver nada, de lo contrario esto indica que ha habido contaminación y se debe repetir todo el proceso.
